با سلام . خدمت دوست گرامي كه راجع به دكتر راسخ پرسيده :

الان نمي دونم كه زير ميزي ميگيره يا نه چون با گذشت زمان خلق و خوي افراد ممكن است عوض شه

ولي پزشك حازقي است .در مورد روش هاي تغذييه جهت جنسيت جنين در اينترنت مطالب مفيدي مي توانيد پيدا كنيد . مصرف مواد سر شار از سديم و پتاسيم گرايش تخمك را به كروموزوم y  زياد مي كند و مصرف كلسيم و منيزيم گرايش تخمك به كروموزوم X را زياد مي كند . در زمان در داروخانه ها كيت تعيين تاريخ تخمك گذاري نيز وجود دارد كه نقش مفيدي در تععين تاريخ دقيق تخمك گذاري دارد.

+ نوشته شده توسط سیامک خوشنود در شنبه بیست و ششم مهر 1393 و ساعت 13:36 |

نيك كالا
 نمايندگي مجاز مرادي

نصب و سرويس محصولات بوتان - نيك كالا- سوزان - توان گاز - سپاهان - نصب شومينه و روشنايي


تلفن : 34663236- 09126936546
كرج - حصارك - روبروي پستخانه - خيابان 12 متري فروردين - روبروي كوچه ابوطالب-  


ادامه مطلب
+ نوشته شده توسط سیامک خوشنود در یکشنبه بیست و یکم مهر 1392 و ساعت 10:38 |
 دو تا مصاحبه دادم و فردا آخریش دعا کنید قبول شم تا مطالب علمی خوب و کاربردی زیادی تو وب براتون قرار بدم.
+ نوشته شده توسط سیامک خوشنود در یکشنبه بیست و نهم اردیبهشت 1392 و ساعت 15:11 |
 

روز طبیعت ۱۳ فروردین گرامی باد

۱۳ بدر خوب و خوشی را برای شما آرزومندم

+ نوشته شده توسط سیامک خوشنود در شنبه دهم فروردین 1392 و ساعت 11:54 |
 

حافظ گشوده ام و چه زيباست فال تو

                                        حتما" قشنگ مي شود امسال حال تو

با آن زبان فاخر و ايراني اصيل

                                           فرخنده باد روز و شب و ماه  و سال تو

سال ۱۳۹۲ مبارك

+ نوشته شده توسط سیامک خوشنود در دوشنبه پنجم فروردین 1392 و ساعت 9:12 |

 

 

۱۲ ماه گذشت. بعضی ها دلشون شکست . بعضی ها دل شکوندن. خیلی ها عاشق شدن و خیلی ها تنها. خیلی ها رفتن و خیلی ها اومدن .... گریه کردیم و خندیدیم.... زندگی بر خلاف آرزو هامون گذشت. چند ساعت مونده ..چند ساعت ازهمه اون خاطره ها ...

آرزو دارم نوروزی که پیش رو داری آغاز روزهایی باشد که آرزو داری.

+ نوشته شده توسط سیامک خوشنود در دوشنبه بیست و هشتم اسفند 1391 و ساعت 15:13 |
آقای غلامرضا روشن با سلام . اخباری که داری درست است. بله من هم همان سیامک برادر کوچک آنها هستم. موفق و موید باشید . سلام شما را به انها حتما٬ می رسانم.
+ نوشته شده توسط سیامک خوشنود در دوشنبه بیست و هشتم اسفند 1391 و ساعت 15:8 |
روش تهيه چند معرف آزمايشگاهي:

«روش تهيه چند معرف آزمايشگاهي»

معرف فوشین (معرف شیف) :

نیم گرم فوشین خالص را در 500 سی سی آب مقطر حل نموده و صاف نمائید. سپس 500 سی سی آب مقطر را با انیدرید سولفورو اشباع نموده و با محلول صاف شده فوق مخلوط کنید و یک شبانه روز به حال خود بگذارید. معرف بیرنگ و حساس است.

معرف تولنز (تولنس) (نیترات نقره آمونیاکی):

در یک لوله آزمایش 1 سی سی نیترات نقره 5% و یک قطره سود 10% اضافه کنید و در حالی که محلول را تکان میدهید چند قطره محلول آمونیاک 2% اضافه نمائید تا فقط رسوب قهوه ای اکسید نقره حل گردد و از مصرف آمونیاک اضافی خودداری کنید. (معرف را کمی قبل از مصرف تهیه کنید زیرا در اثر ماندن تجزیه میشود.)  

معرف فهلینگ :

از دو معرف (الف) و (ب) تشکیل شده که همگام مصرف دو محلول را به نسبت مساوی مخلوط کرده مصرف میکنند.

معرف (الف): 34.6 (سی و چهار ممیز شش) گرم سولفات مس آبدار در 500 سی سی آب مقطر

معرف (ب): 173 گرم تارتارات مضاعف سدیم و پتاسیم و 70 گرم سود در 500 سی سی آب مقطر

معرف يد در يدور پتاسيم (معرف يدوفرم):

طرز تهیه:
 200 گرم يديد پتاسيم را در 100 سي سي آب حل نموده و 10 گرم يد به آن اضافه نمائيد و پس از حل شدن حجم محلول را با آب مقطر به 1 ليتر برسانيد.

معرف بي سولفيت سديم :

طرز تهیه:
 3 سي سي اتانول را به 12 سي سي محلول بي سولفيت سديم 30% اضافه نموده و در صورتي که کمي نمک رسوب نمود، بايد قبل از مصرف به وسيله صاف نمودن جدا شود.
معرف بيال:

طرز تهیه:
600  ميلي گرم اورسينول را در 200 ميلي ليتر اسيد کلريدريک غليظ حل کنيد و 10 قطره کلرور فريک    FeCl3 ده درصد اضافه کنيد.

معرف لوکاس :

طرز تهیه:
يک مول کلرور روي بدون آب را در يک مول اسيد کلريدريک غليظ حل نموده و مخلوط حاصل را سرد کنيد.

معرف 2 و 4 دي نيترو فنيل هيدرازين :

طرز تهیه:
 3 گرم 2 و 4 دي نيترو فنيل هيدرازين را در 15 سي سي اسيد سولفوريک غليظ حل نموده سپس به محلول 20 سي سي آب مقطر و 70 سي سي اتانول 95% اضافه نمائيد و پس از هم زدن صاف کنيد.

معرف سليوانف :

طرز تهیه:
250 ميلي گرم رزورسينول را در 500 ميلي ليتر اسيد کلريدريک 6 نرمال حل کنيد.

معرف بارفود:

طرز تهیه:
 66 گرم استات مس Cu(CH3COO)2   II و 10 ميلي ليتر استيک اسيد گلاسيال را در آب حل کنيد و حجم محلول را به يک ليتر برسانيد.

معرف نيترات آمونيم سريک :

طرز تهیه:
 200 گرم نيترات سريک آمونيم را در 500 سي سي اسيد نيتريک 2 نرمال حل نمائيد (با حرارت سريع تر حل ميشود). رنگ معرف زرد مايل به نارنجي ميباشد .

معرف موليش:

طرز تهیه

: 8 گرم 1-نفتل را در 202 ميلي ليتر اتانول حل کنيد.

معرف بند لکیت:(معرف گلوکز است)


طرز تهیه:


173گرم نیترات سدیم-100گرم کربنات سدیم بی آب را به کمک حرارت در 800میلی لیتر آب حل کنید و در صورت لزوم از صافی بگذرانید سپس حجم را به 850میلی لیتر برسانید.3/17گرم سولفات مس را در 100 میلی لیتر آب جداگانه حل کنید سپس آن رادر حالی که مرتباٌهم می زنید در محلول اول بریزید.وسپس حجم را به یک لیتر برسانید.

معرف استو کارمن :

طرز تهیه:


 45 میلی لیتر اسید استیک – 1 گرم کارمن – 55 میلی لیتر آب مقطر
روش : کارمن را با استیک اسید مخلوط کنید وآب بیفزایی مخلوط را تا درجه ی جوش برسانید سپس سرد وصاف کنید.

معرف گیمسا (برای مشاهده ی گلبرگها ی سفید خون) :

طرز تهیه:


 3 گرم پودر گیسما را در 350 سی سی تا 375 سی سی متانول کا ملاً حل کنید سپس 150 سی سی گلسیرین به آن اضافه کنید وبه مدت 12 ساعت در حرارت 37 درجه قرار دهید.

محلول کارمن زاجی (برای رنگ آمیزی بافتهای گیاهی) :

طرز تهیه:


 1 گرم پودر کارمن را با 4 گرم زاج آمونیاکی مخلوط ودر 100 سی سی آب مقطر حل می کنیم محلول را 20 دقیقه جوشانده ومدت 12 ساعت آن را بی حرکت می گذاریم ،سپس صاف نموده ومورد استفاده قرار می دهیم در صورتی که به مقدار زیاد از این محلول تهیه شود یا بخواهیم مدتی آن را نگه داریم برای جلوگیری از کپک زدگی چند بلور فنیک اسید را در لوله ی آزمایش ریخته ودر حرارت ذوب نموده سپس به محلول رنگی مزبور اضافه می کنیم.

معرف فنل فتالئین (معرف بازها) : 
 در محیط بازی قرمز ارغوانی می شود.

طرز تهیه:
 فنل فتالئین را می توان به نسبت 50 به 50 در آب والکل حل کرد.

 16فرمل 5 درصد ( ماده ی تثبیت کننده و نگهداری کننده است) 
 مثلاً برای تشریح چشم گاو وقبلاً باید به مدت 2 روز در محلول فرمل نگهداری شود.

 طرز تهیه:
 فرمل تجارتی معمولاً 40 درصد است لذا برای تهیه ی محلول فرمل 5 درصد ،5 قسمت از فرمل تجارتی را با 35 قسمت آب مقطر مخلوط کنید محلول 5 درصد حاصل شود.

معرف لوگل (برای رنگ آمیزی ) یا محلول ید یدوره :


طرز تهیه:
3گرم بلورید- 6 گرم ید ید پتاسیم (ید ور پتاسیم)

ید یدپتاسیم را در 200 میلی لیتر آب مقطر حل کرده بلورهای ید را به آن بیفزایی وآنگاه به کمک آب مقطر حجم را به یک لیتر برسانید لازم است محلول مزبور 24 ساعت قبل از به کار بردن تهیه شود چون ید به آرامی در آب حل می شود.

معرف بیوره (معرف پروتئینهااست) :
طرز تهیه:
به یک لیتر محلول سود 10درصد 25 میلی لیتر محلول سولفات مس 3 درصد بیفزائید.(3 گرم سولفات مس را به100 میلی لیتر آب اضافه کنید محلول 3 درصد ساخته خواهد شد)این محلول در صورت ماندن خراب می شود پس باید تازه تهیه شود.

 معرف بلو دو متیلن (برای رنگ آمیزی بافتهای مرده است) :

طرز تهیه:
محلول ذخیره 48/1گرم ماده ی خشک را به 100 میلی لیتر الکل ایزوپروپیل اضافه کنید محلول کار ،محلول ذخیره را باید به نسبت 1 به 10 رقیق کرد(10میلی لیتر محلول با 90 میلی لیتر آب مقطر)

 معرف سودان (برای رنگ آمیزی چربیها) :

طرز تهیه:
 50 میلی لیتر استون را به 50 میلی لیتر الکل 70 درصد بیفزائید وسپس سودان      را تا رسیدن به حد اشتعال در محلول حاصله بریزید بدین ترتیب محلولی 2/0درصد فراهم می آید.

 معرف برم تیمول بلو (معرف co2است) :
طرز تهیه:
5/0گرم برم تیمول بلو را در 500 میلی لیتر آب حل کنید سپس یک قطره آمونیاک به آن بیفزایید تا رنگش آبی تیره شود (محلول ذخیره است)برای ساختن محلول 20 قطره در یک لوله آزمایش کافی است. 

معرف کریستال ویوله (برای استفاده در باکتری شناسی) :
طرز تهیه:
14 گرم کریستال ویوله را در 100 میلی لیتر الکل ایزو پروپیل 95 درصد حل کنید ومحلول را 2روز به حال خود بگذارید،سپس محلول را صاف کنید. این محلول ذخیره است .برای استفاده در باکتری شناسی ، محلول را تا 10 برابر با آب رقیق کنید.

محلول رینگر (برای نگهداری بافتهای زنده)مانند قورباغه :

طرز تهیه:
 3/0گرم کلرید کلسیم- 25/0گرم کلرید پتاسیم- 5/6گرم کلرید سدیم این موارد را یک لیتر آب مقطر حل کنید.

پستانداران:موارد زیر را در یک لیتر آب مقطر حل کنید.

3/0گرم کلرید کلسیم- 25/0گرم کلرید پتاسیم – 5/8گرم کلرید سدیم.

+ نوشته شده توسط سیامک خوشنود در شنبه بیست و هفتم آبان 1391 و ساعت 13:32 |

+ نوشته شده توسط سیامک خوشنود در جمعه دوازدهم آبان 1391 و ساعت 2:18 |

قواعد مشخصی‌ برای‌ اینکه‌ بتوان‌ با اطمینان‌ یک‌ جفت‌ پرایمر موثر را انتخاب‌ کرد وجود ندارد. در حال‌ حاضر پرایمر بیش‌ از هر عامل‌ دیگری‌ عامل‌ موفقیت‌ یا شکست‌ در یک‌ واکنش‌ تکثیری‌ است. بعضی‌ قواعد راهنمایی‌های‌ مفیدی‌ را در مورد طراحی‌ آغازگر بیان می‌کنند:

1- طول‌ متوسط‌ هر پرایمر بین‌ 30-18 جفت‌باز باشد، زیرا پرایمر با طول‌ کوچک‌ اتصال‌ غیراختصاصی‌ را افزایش‌ داده و پرایمر بزرگ سرعت‌ هیبریداسیون‌ را کم‌ می‌کند.

2- مقدارG-C دو پرایمر با هم‌ مشابه‌ بوده‌ و حدود 50-60 درصد باشد.

3- آغازگرها باید از نظر مکمل‌ بودن‌ با هم‌ کنترل‌ شوند. (پرایمر دایمر یا آغازگر دوتایی‌ یک‌ تکثیر مصنوعی‌ است‌ که‌ اغلب‌ در محصول PCR مشاهده می‌شود و عبارتست‌ از یک‌ قطعة دو رشته‌ای‌ که‌ طول‌ آن‌ تقریبا به‌ مجموع‌ دو پرایمر نزدیک‌ است‌ و هنگامی‌ مشاهده‌ می‌شود که‌ یک‌ پرایمر توسط‌ آنزیم‌ پلیمراز به‌ روی‌ پرایمر دیگر گسترش‌ یابد. مکانیزم‌ واقعی‌ که‌ چگونه‌ پرایمر دایمر تشکیل‌ می‌شود بدرستی‌ مشخص‌ نیست. پرایمرها با انتهای‌مکمل‌ َ3 مستعد تشکیل‌ دایمر هستند. ممکن است ضعف‌ در آنزیم Taq باعث‌ پلیمریزاسیون‌ مستقیم‌ الگوی ‌غیرهدف‌ شود. در هر حال‌ چنانچه‌ پرایمر دایمر بعنوان‌ مانعی‌ مشاهده‌ شوند می‌توان‌ آن‌ را تا حدودی‌ با غلظت‌ حداقل‌ پرایمر و آنزیم‌ کاهش‌ داد).

4- در انتهای‌ َ3 پرایمر باید حداقل یک C یا G قرار گیرد در توالی‌هایی‌ که پرایمرهای آنها‌ دارای‌ انتهای‌ َ3 غنی‌ا زG یا C است، احتمال‌ اتصال‌ اشتباهی‌ افزایش‌ می‌یابد.

5- باید تا حد امکان‌ از توالی‌های‌ پالیندرومیک‌ داخل‌ پرایمرها جلوگیری‌ کرد.

6- نسبت‌ چهار نوکلئوتید در آغازگر حتی‌المقدور یکسان‌ باشد.

7- آغازگر به‌ توالی‌ تکرار شونده‌ ختم‌ نشود.

8- دمای Tm دو آغازگر نزدیک‌ هم‌ باشد. (حدمجاز دمای‌ اتصال‌ پرایمر طراحی‌ شده ‌باید بین‌ 65-55 باشد. دمای‌ تکثیرایده‌آل‌ 72-62 می‌باشد).

9- درجه‌ حرارتی‌ که‌ پرایمر به DNA الگو متصل‌ می‌شود به‌ طول‌ آغازگر و مقدارGC آن‌ بستگی دارد برای‌ پرایمرهای‌ حاوی GC 50% و دارای‌ 20 نوکلئوتید، دمای‌ 55 درجه‌سانتیگراد پیشنهاد می‌شود، برای‌ افزایش‌ اختصاصی‌ عمل‌ کردن‌ آغازگر حتی‌ ممکن‌ است‌ دماهای‌ بالاتری‌ هم‌ مورد نیاز باشد.

برای‌ اینکه‌ هر پرایمر با رشته‌ الگوی‌ خودش‌ هیبرید شود لازم‌ نیست‌ که‌ عینا و کاملا مکمل رشتة الگو باشد، برای‌ طراحی‌ پرایمر اغلب‌ از برنامه‌های‌ کامپیوتری‌ ویژه‌ استفاده‌ می‌شود. فاصله‌ بین‌ پرایمرهایی‌ که‌ با DNAی‌ هدف‌ هیبرید می‌شوند بطور معمول‌ کمتر از 15 کیلو باز می‌باشد.‌‌‌‌ در حقیقت‌ یک‌ کاهش‌ اساسی‌ در سنتز موثر هنگامی‌ که‌ محصول‌ تکثیر متجاوز 1000 جفت‌باز می‌شود، مشاهده‌ می‌گردد. به‌ همین‌ دلیل‌ طول‌ قطعه‌ مورد تکثیر درPCR نباید بیش‌ از 3 کیلوباز باشد وحد مطلوب‌ کمتر از 1 کیلوباز می‌باشد. (‌‌‌‌تکثیر قطعات‌ بسیار طویل‌ و بالای 40 کیلوباز مقدور است‌ اما نیاز به‌ روش‌های‌ ویژه‌ای‌ دارد).

دمای‌ ذوب‌ آغازگر :

‌‌‌‌دمای‌ اتصال‌ باید بقدر کافی‌ پایین‌ باشد تا پرایمر و DNA الگو قادر به‌ اتصال‌ باشند و از سوی دیگر باید به‌ قدر مناسب‌ بالا باشد تا از تشکیل‌ اتصالات‌ غیراختصاصی‌ جلوگیری‌ کند. دمای‌ اتصال‌از روی‌ شاخصی‌ به‌ نام‌ درجه‌ حرارت‌ ذوب‌ محاسبه‌ می‌شود. دمای‌ ذوب‌ درجه‌ حرارتی‌ است‌ که‌ درآن‌ نیمی‌ از DNAها به‌ صورت‌ تک‌ رشته‌ای‌ درآمده‌اند. یکی‌ از مهمترین‌ مشخصات Tm ، ‌وابستگی‌ آن‌ به‌ ترکیب‌ بازی DNA است. گوانین و سیتوزین سه‌ پیوند هیدروژنی‌ و آدنین‌ و تیمین‌ دوپیوند هیدروژنی‌ دارند، بنابراین‌ هر چقدر مقدار گوانین‌ و سیتوزین‌ در DNA بیشتر باشد Tm بیشتراست. دمای‌ 2-1 درجه‌ سانتیگراد کمتر از Tm کافیست‌ که‌ هیبریداسیون‌ بین‌ پرایمر وDNAی‌ الگو در آن‌ صورت‌ گیرد. دمای‌ ذوب‌ بطور معمول‌ از طریق‌ فرمول‌ سادة زیر نیز محاسبه‌ می‌شود.

Tm = (4 * (G + C) + 2 *(A + T)) برای‌ هر پرایمر 20 نوکلئوتیدی‌

دو پرایمر باید طوری‌ طراحی‌ شوند که‌ دارای Tm یکسان‌ باشند در غیر اینصورت‌ حرارت‌ مناسب‌ برای‌ یک‌ پرایمر برای‌ جفت‌ دیگر نامناسب‌ خواهد بود.‌‌‌‌ بسیاری‌ از آزمایشگاه‌ها دمای‌ چسبیدن‌ را از 5-3 درجه‌ سانتیگراد زیر دمای‌ ذوبی (Tm) که‌ طریق‌ این‌ فرمول‌ محاسبه‌ شده‌است‌ درنظر می‌گیرند. از این‌ موضوع‌ نتیجه‌ گرفته‌ می‌شود که ‌پرایمرهای‌ با طول‌ زیاد باعث‌ افزایش‌ بالا رفتن‌ اختصاصی‌ بودن‌ واکنش‌ نمی‌شود. (البته فرمول‌های دیگری نیز برای محاسبة Tm وجود دارند.)

غلظت‌ پرایمرها و روش‌ اندازه‌گیری‌ آن‌ :

‌‌‌‌غلظت‌ پرایمر بین‌ 50/0 تا 5/0 میکرومول‌ و حد مطلوب‌ 6/0 - 1/0 برای‌ یک‌ واکنش 25 میکرولیتری‌ می‌باشد. غلظت‌ بالای‌ پرایمر باعث‌ بسط‌ غیراختصاصی‌ و پرایمر دایمر می‌شود.

اتصال‌ پرایمر :

‌‌‌‌دما و مدت‌ زمان‌ لازم‌ برای‌ اتصال‌ پرایمر به طول‌ پرایمر، ترکیب‌ نوکلئوتید و غلظت‌ پرایمر بستگی‌ دارد.‌‌‌‌

با توجه‌ به‌ طیف‌ فعالیت‌ آنزیم Taq پلی‌مراز که‌ در محدوده‌ 58-20 درجه‌ سانتیگراد می‌باشد، دمای‌ اتصال‌ در محدودهِ 72-55 درجه‌ سانتیگراد بطور معمول‌ بهترین‌ نتیجه‌ را می‌دهد افزایش ‌دمای‌ اتصال‌ بسط‌ غیراختصاصی‌ را در انتهای‌ َ3 پرایمر کاهش‌ می‌دهد. دمای‌ پایین‌ تکثیر همراه‌ باغلظت زیاد،‌ اختصاصی‌ بودن‌ واکنش‌ را کاهش‌ می‌دهد.

بسط‌ پرایمر :

‌‌‌‌مدت‌ زمان‌ بسط‌ بستگی‌ به‌ طول‌ توالی‌ هدف، غلظت‌ توالی‌ هدف‌ و دمای تکثیر دارد.‌‌‌‌ بسط‌ پرایمر بطورمعمول‌ در دمای‌ 72 درجه‌ سانتیگراد انجام‌ می‌شود (این زمان‌ برای‌ فرآورده‌های‌ معادل‌ 2 کیلو باز کافیست)‌.

+ نوشته شده توسط سیامک خوشنود در پنجشنبه سیزدهم مهر 1391 و ساعت 11:50 |


Powered By
BLOGFA.COM


دريافت كد در بهاربيست

Best Cod Music

FreeCod Fall Hafez


کد شمارش معکوس سال نو

فال عشق

آمار سایت