ترجمه از دکتر سیامک خوشنود

چرا جوجه های "واکسینه شده" هنوز به IBV آلوده می شوند  و در مورد آن چه باید کرد؟

در حالی که بسیاری از واکسن‌ها و برنامه‌های واکسیناسیون به طور مؤثری در برابر ویروس برونشیت عفونی (IBV) در طیور محافظت می‌کنند، شیوع این بیماری همچنان در گله‌های واکسینه‌شده رخ می‌دهد وتولیدکنندگان را ناامید می‌کند و بدتر از آن، سلامت، رفاه و عملکرد پرندگان را به خطر می‌اندازد.

چرا این شکست ها رخ می دهد؟ و مهمتر از آن، چگونه می توان از آنها پیشگیری کرد؟ برایان جردن، دکترای تخصصی، دانشیار دانشگاه جورجیا، اخیراً بینش و توصیه های خود را با مجله سلامت طیور امروز به اشتراک گذاشته است.

چرا بیماری با وجود واکسیناسیون شیوع پیدا می کند؟

جردن توضیح داد: اولاً، واکسن‌های مورد استفاده ممکن است با ویروس در گردش مناسب نباشند، زیرا ممکن است انواع جدیدی از IBV ایجاد شود.

ثانیاً، او اشاره کرد که شیوع بیماری ممکن است ناشی از خطاهای انسانی یا مکانیکی باشد که منجر به گله های نیمه واکسینه شده شود. این اغلب منجر می شود به "واکسنی که داده شده است به تکثیر و چرخش در گله ادامه می دهد، که گاهی اوقات می تواند به خودی خود باعث بیماری شود، اگر واکنش آن کاهش نیابد."

سایر مواقع اشکال در فرآیند واکسیناسیون می باشد. "آنقدر کیفیت واکسن افت می کند که پرندگان در واقع اصلاً واکسینه نمی شوند." وی افزود: در این موارد، "هر ویروسی که در آنجا وجود داشته باشد و قابلیت بیماری زایی داشته باشد، می تواند وارد شود و باعث بیماری شود."

چه چیزی می تواند باعث شود که فرآیند واکسیناسیون - یکی از اصلی ترین اساس پرورش طیور – ضعیف باشد و روند آن اینقدر بد پیش برود؟

جردن به حجم زیاد آن اشاره کرد. متوسط جوجه کشی ایالات متحده روزانه 200000 تا 300000 جوجه می باشد، بنابراین واکسیناسیون "به طور دسته جمعی" انجام می شود و هر بار 100 جوجه در یک سبد قرار می گیرند و با واکسن اسپری می شوند. مشکلات در هر جایی از این فرآیند، از نگهداری واکسن و تاریخ انقضا گرفته تا مخلوط کردن و جابجایی آن، ممکن است رخ دهد.

او خاطرنشان کرد: گاهی اوقات چیزی به سادگی محاسبه دوز ممکن است اشتباه شود.

برای مقابله با مشکلات در فرآیند واکسیناسیون، جردن تاکید کرد که تولیدکنندگان باید مطمئن شوند که واکسن ها به درستی مخلوط شده اند و آنها در دوز توصیه شده و با رقیق کننده درست استفاده می شوند. تمام جنبه های کابینت اسپری نیز از جمله پیستون ها، فیلترها و نازل ها باید به طور کامل بررسی شود . متغیرهای دیگری مانند اندازه قطرات، فاصله از نازل تا کابینت، حرکت هوا و دمای اتاق نیز تاثیردارند.

چگونه تشخیص دهیم که یک واکسن به درستی عمل می کند؟

به گفته جردن، در اینجا چندین راه برای بررسی عملکرد صحیح واکسن وجود دارد. یکی از رویکردهای پیشرفته، فناوری تصویربرداری حرارتی است، که در آن شما "در واقع شاهد واکسینه شدن جوجه های خود هستید" و پوشش دهی اسپری را ارزیابی می کنید. تکنیک دیگر شامل ارزیابی الگوی اسپری روی پلکسی است.

اما در نهایت، شما باید وارد شوید و از پرندگان «بپرسید».

این معمولاً شامل گرفتن سواب از پرندگان یا معدوم کردن آنها و بررسی کل نای برای تعیین سروتیپ واکسنی است که به پرندگان داده شده است. سپس سروتیپ ها 5 تا 7 روز پس از واکسیناسیون از طریق آزمایش واکنش زنجیره ای پلیمراز بلادرنگ (Real – time PCR) مورد بررسی قرار می گیرند.

جردن خاطرنشان کرد که به دلیل پیشرفت های فناوری، آزمایش PCR شواهدی را ارائه می دهد که نشان می دهد کدام واکسن تزریق شده است، چند پرنده واقعاً واکسن را دریافت کرده اند و چه سطحی از واکسن دریافت کرده اند که همه این ها شاخص های خوبی از عملکرد واکسن هستند.

فرآیند تست PCR

آزمایش PCR به سروتیپ‌های واکسنی می‌پردازد که باید در هچری داده می‌شدند، مانند واکسن جورجیا/08 یا ماساچوست. جردن گفت که اکثر عملیات ها برای دو سروتیپ و به ندرت برای یک یا سه سروتیپ  واکسینه و آزمایش می شوند. جردن توضیح داد که آزمایش مناسب مستلزم گرفتن 15 نمونه در هر مجموعه نمونه است که می تواند نشان دهنده یک یا چند خانه در یک فارم باشد. این 15 نمونه سپس به عنوان شش مجموعه در هر صفحه 96 چاهکی ("کارآمدترین راه برای اجرای این صفحات") استفاده می شود، بنابراین 90 نمونه در مجموع که همه به یکباره آزمایش می شوند.

معمولاً، تولیدکنندگان از یک خانه در شش فارم مختلف نمونه می‌گیرند، بنابراین شش مجموعه متفاوت دریافت می‌کنیم. جردن توضیح داد که ما می‌توانیم همه آن نمونه‌ها را یکجا اجرا کنیم.

آنها می توانند در روزهای مختلف واکسن متفاوت باشند، بنابراین ممکن است یک گله در روز دوشنبه، یک گله در روز سه شنبه و یک گله در روز پنجشنبه واکسینه شده باشد، بنابراین ما می توانیم به نوعی به پیشرفت روز به روز در هچری نگاه کنیم.

این مرحله برای سه نتیجه آزمایش احتمالی می باشد. ممکن است با 90 درصد یا بیشتر نمونه‌های مثبت، مشخص شود که «هر دو واکسن عملکرد خوبی داشتند». نتیجه دوم ممکن است نشان دهد که یک واکسن عمل می کند اما دیگری نه - وضعیتی که معمولاً زمانی رخ می دهد که یک واکسن در نیتروژن مایع ذخیره می شود و بخشی از واکسن در فرآیند ذوب از بین می رود. در موارد کمتر، یک محصول لیوفیلیزه شده و خشک شده در انجماد بسیار ضعیف تر ممکن است خوب نباشد - به خصوص اگر با دوز کامل داده نشود.

در مورد سوم، جایی که هر دو واکسن ضعیف هستند، جردن گفت: «این معمولاً نشان می‌دهد که مشکلی در تجهیزات وجود دارد، ماشین‌آلات و یا سرنگ‌ها درست کار نمی‌کنند، شاید حجم استفاده خیلی کم بوده، نازل‌ها خیلی کوچک هستند و یا در کابینت  قطرات خیلی کوچک تولید می شود.

عیب یابی نتایج ضعیف

جایی که عملکرد یکی از دو واکسن ضعیف است، ممکن است به این دلیل باشد که واکسن منجمد شده و درست تهیه نشده است. منجمد بودن به خودی خود مشکلی نیست . ذوب شدن و مخلوط کردن واکسن منجمد است که می تواند مشکل ایجاد کند. جردن گفت که تولیدکنندگان باید پروتکل های آماده سازی و جابجایی خود را بررسی کنند. مواردی که باید بررسی شوند عبارتند از مدت زمانی که واکسن اجازه منجد شدن دارد، دمای آب در حین ذوب و مدت زمانی که برای استفاده از همه واکسن پس از رقیق شدن لازم است.

در مواردی که هر دو واکسن ضعیف عمل می کنند، تمام مراحل فرآیند واکسن باید بررسی شوند که از حجم کاربرد، سرعت جریان نازل و فشار روی سرنگ ها برای خارج کردن واکسن شروع می شود. سپس تولیدکنندگان باید تنظیمات لازم را برای بهبود کاربرد واکسن انجام دهند.

جردن در توصیه به تولیدکنندگان در مورد چگونگی دریافت بهترین واکسن خود، گفت بهترین شاخص برای اینکه آیا جوجه ها به اندازه کافی در معرض واکسن قرار گرفته اند یا خیر  PCRاست. بنابراین، برای تأسیساتی که هرگز نمونه‌برداری را در یک مکان خاص انجام نداده‌اند، او انجام آزمایش PCR را برای ایجاد یک خط پایه قبل از انجام هرگونه تنظیم در فرآیندها توصیه می‌کند.

جردن گفت تولیدکنندگان نباید از شیوع بیماری پس از واکسیناسیون هراس داشته باشند تا زمانی که از روش های مناسب پیروی کنند.

وی خاطرنشان کرد که در جوجه کشی هایی که به خوبی مدیریت می شوند، واکسن ها به طور مداوم در نمونه گیری خوب به نظر می رسند. بعلاوه، طی 5 سال بررسی واکسن، تعداد بهبود یافته است. او نتیجه گرفت که امروزه نمونه‌برداری معمولاً «نه برای تشخیص نقص، بلکه فقط برای بررسی نقطه‌ای و اطمینان از عملکرد بهینه انجام می‌شود».

Why ‘vaccinated’ chickens still get infected with IBV — and what to do about it

 

While many vaccines and vaccination programs effectively protect against the highly contagious infectious bronchitis virus (IBV) in poultry, outbreaks of the disease still occur in vaccinated flocks — frustrating producers and, worse yet, compromising the health, welfare and performance of the birds.

Why do these breaks occur? And more importantly, how can they be prevented? Brian Jordan, PhD, associate professor at the University of Georgia, recently shared his insights and advice with Poultry Health Today.

Why disease breaks out despite vaccination

First, the vaccines used may not have been a good match for the circulating virus because new variants of IBV can arise, Jordan explained.

Secondly, he indicated that outbreaks may result from human or mechanical errors, leading to partially vaccinated flocks. That often leads to a “roll of the vaccine that was given, where it continues to replicate and cycle through a flock, which can sometimes cause disease in and of itself if that reaction is not mitigated.”

Other times breakdowns in the vaccination process “go so awry that the birds actually don’t get vaccinated at all.” In those cases, he added, “any virus that was out there that had a little bit of pathogenicity to it could come in and cause disease.”

What can make the vaccination process — a staple of poultry farming — go so badly?

Jordan pointed to the sheer volume involved. The average US hatchery processes 200,000 to 300,000 chicks a day, so vaccination is done “en masse,” with 100 chicks at a time placed in a basket and sprayed with vaccine. Problems can occur anywhere in this process, from vaccine storage and expiration dates to the mixing and handling of it.

“Sometimes just something as simple as calculating the dose can go awry,” he noted.

To counter problems in the vaccination process, Jordan stressed that producers need to make sure vaccines are properly mixed and that they are being used at the recommended dose and with the correct diluent. All aspects of the spray cabinet should be thoroughly examined as well, including the pistons, filters and nozzles. Other variables such as droplet size, distance from nozzles to cabinet, air movement and room temperature also come into play.

How to tell that a vaccine is working properly

here are several ways to check whether a vaccine is working properly, according to Jordan. One high-tech approach is thermal-imaging technology, where you “actually watch your chicks get vaccinated” and evaluate the spray coverage. Another technique involves evaluating the spray pattern on plexi glass.

“But ultimately, you have to go in and ‘ask’ the birds,” he said.

This usually involves taking swabs from the birds or euthanizing them and examining the whole trachea to determine the vaccine serotypes the birds were given. The serotypes are then examined 5 to 7 days post-vaccination through real-time polymerase chain reaction (PCR) testing.

Jordan noted that because of technology advancements, PCR testing provides evidence of which vaccines were given, how many birds actually received the vaccine and what level of vaccine they received — all good indicators of how the vaccine will perform.

The PCR testing process

The PCR test looks at those vaccine serotypes that should have been given in the hatchery, such as a Georgia/08 or a Massachusetts vaccine. Most operations vaccinate and test for two serotypes, more rarely for one or three, Jordan said.

Proper testing requires taking 15 samples per sample set, which can represent one or several houses on a farm, Jordan explained. These 15 samples are then used as six sets per one 96-well plate (“the most efficient way to run these plates”), so 90 samples total, which are all tested at once.

“Typically, producers will take samples from one house on six different farms, so we get six different take sets. We can run all those samples at once,” Jordan explained.

“They can be varied across different vaccine days, so maybe one flock was vaccinated on Monday, one flock on a Tuesday and one flock on a Thursday, so we can kind of look at a day-to-day progression within the hatchery.”

This sets the stage for three possible test results. One might reveal “both vaccines had a good take” with 90% or more of the samples positive. A second result might show that one vaccine takes but the other doesn’t — a situation that usually occurs when one vaccine is stored in liquid nitrogen and some of the vaccine is killed in the thawing process. Less often, a more highly attenuated lyophilized, freeze-dried product may not take well — especially if not given at a full dose.

In the third case, where both vaccine takes are poor, Jordan said “that usually indicates there’s a problem with the equipment, with the machinery, the syringes aren’t functioning right, maybe the application volume was too small, the nozzles are too small [or] in the cabinet you’re creating small droplet

Troubleshooting poor results

Where one of two vaccine takes is poor, it could be because the vaccine was frozen and was not prepared correctly. Being frozen in and of itself is not the problem ⸺ it’s the thawing and mixing of the frozen vaccine that can create an issue. Jordan said producers must examine their mixing and handling protocols. Items to be checked include the length of time the vaccine is allowed to thaw, the temperature of the water during thawing and the amount of time it takes to use all vaccine once it has been diluted.

Where both vaccines take poorly, all steps in the vaccine process must be examined, beginning with the volume of application, the nozzle flow rate and the pressure on the syringes to force out the vaccine. Producers must then make the necessary adjustments to improve the vaccine application.

In advising producers how to get the best from their vaccine, Jordan said PCR is the best indicator of whether chicks were adequately exposed to the vaccine. So, for facilities that have never done sampling at a particular location, he recommends doing PCR testing to establish a baseline before any adjustments are made in the processes.

Jordan said producers need not fear post-vaccination disease outbreaks as long as they follow proper procedures.

He noted that in well-managed hatcheries, vaccines consistently look good on sampling. Plus, in 5 years of checking vaccine takes, he has seen an improvement in numbers. Nowadays, he concluded, sampling is usually done “not to diagnose a failure but just to spot check and make sure that we’re running optimally.”