رنگ آمیزی گرم:

 رنگ آمیزی گرم روشی جهت بررسی باکتری ها و مشاهده آن ها در زیر میکروسکوپ نوری و تشخیص افتراقی گرم مثبت و گرم منفی می باشد.

روش کار 

1-        تهیه گسترش روی لام : یک قطره آب مقطر روی لام چکانده سپس با لوپ استریل یک کلنی تازه از محیط برداشته و داخل قطره آب حل شد و  در دمای محیط خشکانده شد. سپس لام جهت فیکس کردن نمونه سه بار از روی شعله عبور داده شد.

2-        رنگ آمیزی با کریستال ویوله : در این مرحله مقداری از رنگ کریستال ویوله با قطره چکان به روی سطح گسترش میکروبی روی لام به مدت یک دقیقه قرار داده شد تا رنگ در دیواره سلولی میکروبها نفوذ کند.

3-        مرحله شستشو: پس از 1 دقیقه ، رنگ اضافی روی لام را خالی شده و با استفاده از آب مقطر سطح روی گسترش شست و شو داده شد.

4-        مرحله اضافه کردن محلول لوگول : چند قطره از محلول لوگول را روی گسترش پخش کرده و اجازه دادیم 30 ثانيه روی نمونه باقی بماند . سپس محلول اضافی خالی شده و لام با آب مقطر شست و شو داده شد.

5-        مرحله رنگ بری با استفاده از استن – الکل : لام را با زاویه 45 درجه نگه داشته و با استفاده از محلول رنگ بر الکل – استن بسرعت شست و شو داده شد.        

6-        رنگ آمیزی با سافرانین یا فوشین : در این مرحله سطح گسترش را با رنگ ثانویه یعنی سافرانین به مدت 60 ثانیه پوشانده شد و سپس با آب مقطر شسته شد.          

7-        لام رنگ آمیزی شده روی کاغذ خشک کن قرار داده شد تا خشک شود.